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產品詳情
  • 產品名稱:人乳腺成纖維細胞

  • 產品型號:
  • 產品廠商:乾思生物
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簡單介紹:
人乳腺成纖維細胞
詳情介紹:

產品基本信息

細胞名稱: 人乳腺成纖維細胞
種屬來源:
組織來源: 手術切除的正常乳腺組織
疾病特征: 正常原代細胞
細胞形態(tài): 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)基: 我們推薦使用EliteCell原代成纖維細胞培養(yǎng)體系(產品編號:PriMed-EliteCell-003)作為體外培養(yǎng)原代乳腺成纖維細胞的培養(yǎng)基。
生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲存
細胞鑒定: 纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,經鑒定細胞純度高于90%。
QC檢測: 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。


人乳腺成纖維細胞特點和簡介

乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數可以重復經歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,這些纖維結締組織對**起固定作用,而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的。
 
起支持作用和固定**位置的纖維結締組織稱為**懸韌帶或Coopers韌帶。淺筋膜深層位于乳腺的深面,與胸大肌筋膜淺層之間有疏松組織相連,稱**后間隙。它可使**既相對固定,又能在胸壁上有一定的移動性。

人乳腺成纖維細胞接受后處理

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。
 

人乳腺成纖維細胞培養(yǎng)操作

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。

 2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
   
     1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

     4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

人乳腺成纖維細胞培養(yǎng)注意事項

 1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
 
 2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題,責任由客戶自行承擔。

 3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

 4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

 5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

 6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

 7.該細胞僅供科研使用。


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產品應用舉例

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